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液相色譜儀的操作步驟分為以下五步

更新時(shí)間:2024-12-16      點(diǎn)擊次數(shù):144
  液相色譜儀是采用新技術(shù),功能齊全操作更簡(jiǎn)便,符合儀器檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),其性能穩(wěn)定,面向銷售。STI501高效液相色譜儀廣泛的應(yīng)用于食品、制藥、化工、研究等領(lǐng)域,深受廣大用戶的信賴。其主要核心配置:UV501紫外檢測(cè)器、P501高壓恒流輸液泵、P500高壓混合器、VertexC18液相分析柱、7825i手動(dòng)進(jìn)樣閥、液相微量進(jìn)樣針、維護(hù)工具包。
  液相色譜儀的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。
  液相色譜儀的操作:
  1、準(zhǔn)備工作
  流動(dòng)相準(zhǔn)備:溶劑和樣品必須通過(guò)0.45微米膜過(guò)濾,以去除雜質(zhì)和顆粒物。使用前,溶劑需超聲脫氣30分鐘以上,以避免氣泡影響分析結(jié)果。
  連接流動(dòng)相:將A管連接到有機(jī)相,B管連接到水相。確保溶劑完q浸沒(méi)吸濾頭,并且在整個(gè)過(guò)程中,溶劑液面不能低于吸濾頭。
  系統(tǒng)清潔:保持HPLC系統(tǒng)內(nèi)外清潔,室內(nèi)溫度恒定,因?yàn)闇囟茸兓瘯?huì)影響檢測(cè)器的性能。
  2、系統(tǒng)啟動(dòng)
  啟動(dòng)泵和檢測(cè)器:先啟動(dòng)泵,運(yùn)行5分鐘排除系統(tǒng)中的氣泡,然后關(guān)閉排氣閥,再啟動(dòng)檢測(cè)器。
  軟件設(shè)置:打開(kāi)高效液相色譜軟件,設(shè)置運(yùn)行參數(shù),如分析時(shí)間、檢測(cè)波長(zhǎng)和流速等。這些參數(shù)根據(jù)具體樣品和方法進(jìn)行調(diào)整。
  3、樣品分析
  基線穩(wěn)定:在設(shè)定流速下運(yùn)行流動(dòng)相,直至基線平穩(wěn)??梢栽谲浖斜O(jiān)視基線情況。
  進(jìn)樣:將固定體積的樣品溶液注入進(jìn)樣閥,然后在軟件中啟動(dòng)進(jìn)樣命令,使樣品隨流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱。
  數(shù)據(jù)監(jiān)控:通過(guò)軟件監(jiān)視檢測(cè)器的讀數(shù),當(dāng)所有峰值出現(xiàn)后,停止運(yùn)行并設(shè)置下一次進(jìn)樣。每次分析之間,建議間隔5-10分鐘,讓流動(dòng)相通過(guò)色譜柱清洗殘留物。
  4、數(shù)據(jù)分析
  定量分析:分析結(jié)束后,利用色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)將檢測(cè)到的信號(hào)轉(zhuǎn)換為色譜圖,其中x軸表示時(shí)間,y軸表示檢測(cè)器信號(hào)。通過(guò)色譜圖可以對(duì)各組分進(jìn)行定量分析。
  結(jié)果解讀:根據(jù)色譜圖中的保留時(shí)間和峰面積等信息,對(duì)分離效果和樣品成分進(jìn)行評(píng)估和解釋。
  5、系統(tǒng)關(guān)閉
  關(guān)閉設(shè)備:分析完成后,先關(guān)閉檢測(cè)器,再關(guān)閉泵,最后關(guān)閉軟件。正確關(guān)閉設(shè)備有助于延長(zhǎng)儀器壽命。
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